Copyright 1996
InterAm Database
National Law Center for Inter-American Free Trade

26 de junio de 1996

Diario Oficial

NORMA Oficial Mexicana NOM-035-ZOO-1996, Requisitos mínimos para 
las vacunas, antígenos y reactivos empleados en la prevención y control 
de la rabia en las especies domésticas. 


Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados Unidos 
Mexicanos.- Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural. 
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-035-ZOO-1996, REQUISITOS 
MINIMOS PARA LAS VACUNAS, ANTIGENOS Y REACTIVOS EMPLEADOS 
EN LA PREVENCION Y CONTROL DE LA RABIA EN LAS ESPECIES 
DOMESTICAS. 
ROBERTO ZAVALA ECHAVARRIA, Director General Jurídico de la 
Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural, con fundamento en los 
artículos 35 fracción IV de la Ley Orgánica de la Administración Pública 
Federal; 4o. fracciones I, III, V y XI, 12, 16, 21, 28, 29, 44 y 47 de la Ley 
Federal de Sanidad Animal; 1o., 38 fracción II, 40 fracciones III y XI, 41 y 47 
fracción IV de la Ley Federal sobre Metrología y Normalización; 12 fracciones 
XXIX y XXX del Reglamento Interior de esta Dependencia, y 
CONSIDERANDO 
Que es función de la Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo 
Rural fomentar la producción pecuaria y consecuentemente prevenir, controlar 
y erradicar las plagas y enfermedades que como la rabia afectan a la ganadería 
nacional, tanto en su nivel de producción como en la calidad de sus productos. 
Que la rabia es una enfermedad infecto-contagiosa, aguda y mortal que 
ataca el sistema nervioso central, provocada por un virus del género Lyssavirus 
y de la familia Rhabdoviridae, transmitida al hombre o animales por la saliva de 
algún animal enfermo o por material contaminado. 
Que esta enfermedad se controla y previene mediante acciones conjuntas 
de los sectores público, social y privado ofreciendo información educativa al 
respecto en función de una vigilancia epidemiológica eficaz, la vacunación y el 
control de la población canina, el control de la población murciélago 
hematófago (vampiro) y la vacunación de animales de otras especies 
domésticas susceptibles particularmente las de interés económico en riesgo, a 
fin de reducir las considerables pérdidas económicas en la ganadería del país. 
Que es necesario garantizar la producción de vacunas de la más alta 
calidad contra la rabia, para inmunizar a las especies domésticas contra esta 
enfermedad.  
Que es necesario establecer la Norma Oficial Mexicana que regule los 
requisitos mínimos de las vacunas, antígenos y reactivos empleados en 
prevención y control de la rabia en las especies domésticas. 
Que para alcanzar los objetivos señalados en los párrafos anteriores, con 
fecha 16 de octubre de 1995, se publicó en el Diario Oficial de la Federación 
el Proyecto de Norma Oficial Mexicana NOM-039-ZOO-1995, "Requisitos 
mínimos para las vacunas, antígenos y reactivos empleados en la prevención y 
control de la rabia en las especies domésticas", iniciando con ello el trámite a 
que se refieren los artículos 45, 46 y 47 de la Ley Federal sobre Metrología y 
Normalización, por lo que con fecha 15 de abril de 1996, se publicaron las 
respuestas a los comentarios recibidos en relación a dicho Proyecto. 
Que en virtud del resultado del procedimiento legal antes indicado, se 
modificó la clave de la Norma, así como en aquellos puntos que resultaron 
procedentes y por lo cual, se expide la presente Norma Oficial Mexicana, para 
quedar como NOM-035-ZOO-1996, REQUISITOS MINIMOS PARA LAS 
VACUNAS, ANTIGENOS Y REACTIVOS EMPLEADOS EN LA PREVENCION 
Y CONTROL DE LA RABIA EN LAS ESPECIES DOMESTICAS. 
INDICE 
1.	OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACION 
2.	REFERENCIAS 
3.	DEFINICIONES Y ABREVIATURAS 
4.	REQUISITOS MINIMOS PARA LAS VACUNAS CONTRA LA RABIA, 
DE VIRUS ACTIVO MODIFICADO Y DE VIRUS INACTIVADO 
5.	ESPECIFICACIONES PARA EL CONJUGADO ANTIRRABICO 
PREPARADO CON ANTICUERPOS POLICLONALES  
6.	ESPECIFICACIONES PARA EL CONJUGADO ANTIRRABICO 
PREPARADO CON ANTICUERPOS MONOCLONALES 
7.	ESPECIFICACIONES PARA LA SUSPENSION DE CEREBRO DE 
RATON INFECTADO CON VIRUS ESTANDAR DE 
CONFRONTACION (CVS) 
8.	ESPECIFICACIONES PARA LA SUSPENSION DE CEREBRO DE 
RATON NORMAL (SCN) 
9.	DEL PERSONAL TECNICO RESPONSABLE 
10.	PRODUCTOS IMPORTADOS 
11.	SANCIONES 
12.	CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES 
13.	BIBLIOGRAFIA 
14.	DISPOSICIONES TRANSITORIAS 
1. Objetivo y campo de aplicación 
1.1. La presente Norma es de observancia obligatoria en todo el territorio 
nacional y tiene por objeto establecer los requisitos mínimos para las vacunas, 
antígenos y reactivos empleados en la prevención y control de la rabia en las 
especies domésticas. 
1.2. La vigilancia de esta Norma corresponde a la Secretaría de Agricultura, 
Ganadería y Desarrollo Rural y a los gobiernos de los estados, en el ámbito de 
sus respectivas atribuciones y circunscripciones, territoriales de conformidad 
con los acuerdos de coordinación respectivos. 
1.3. La aplicación de la presente Norma corresponde a la Dirección General 
de Salud Animal, así como a las delegaciones de la Secretaría de Agricultura, 
Ganadería y Desarrollo Rural, en el ámbito de sus respectivas atribuciones y 
circunscripciones territoriales. 
2. Referencias 
Para la correcta aplicación de esta Norma se deben consultar las siguientes 
normas oficiales mexicanas: 
NOM-008-SCF1-1993, Sistema General de Unidades de Medida. 
NOM-011-SSA2-1993, Para la prevención y control de la rabia. 
NOM-003-ZOO-1993, Criterios para la operación de laboratorios para 
pruebas aprobados en materia zoosanitaria. 
NOM-012-ZOO-1993, Especificaciones para la regulación de productos 
químicos, farmacéuticos, biológicos y alimenticios para uso en animales o 
consumo por éstos. 
NOM-030-SCF1-1993ZZ-3-1989, "Información comercial-Declaración de 
cantidad en la etiqueta-Especificaciones". 
NOM-Z-9, "Emblema denominado Hecho en México".  
NOM-EE-143, "Envase y embalaje-Terminología básica".  
3. Definiciones y abreviaturas 
Para efectos de la presente Norma se entiende por: 
3.1. Antígeno: Sustancia que por sí misma sea capaz de estimular una 
respuesta inmune "in vivo", así como también pueda ser utilizada en la 
evaluación de la respuesta inmune "in vitro". 
3.2. Biológico: Todo producto de fabricación nacional o importado con 
regulación correspondiente otorgada por la Secretaría de Agricultura, 
Ganadería y Desarrollo Rural, a través de la Dirección General de Salud 
Animal, procedente del cultivo del virus de la rabia, activo modificado o fijo 
inactivado u otro, que al ser aplicado al animal susceptible confiera inmunidad 
contra dicha enfermedad, de forma tal que los animales vacunados no 
enfermen si son expuestos al virus patógeno contra el cual han sido vacunados. 
3.3. Brote: Presencia de uno o más focos de rabia en un área geográfica 
determinada y en un tiempo determinado. 
3.4. Cepa aprobada: Virus rábico vacunal o virulento que ha sido autorizado 
por la Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural, para ser 
empleado en la producción de vacunas o para las pruebas de desafío, 
respectivamente. 
3.5. Conjugado: Anticuerpos policlonales o monoclonales, marcados 
químicamente con un fluorocromo. 
3.6. Conjugado antirrábico: Anticuerpos policlonales o monoclonales 
específicos contra el virus de la rabia y marcados con un fluorocromo, 
usualmente isotiocianato de fluoresceína. 
3.7. Constatación: Procedimiento mediante el cual la Secretaría de 
Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural verifica que el producto cumple con 
las especificaciones de calidad presentadas por el laboratorio productor y/o las 
normas oficiales mexicanas aplicables. 
3.8. Control: Conjunto de medidas zoosanitarias que tienen por objeto 
disminuir la incidencia y prevalencia de la rabia. 
3.9. Control de calidad: Es el conjunto de actividades llevadas a cabo en el 
laboratorio para certificar que las características del producto cumplen con las 
especificaciones vigentes. 
3.10. CVS: Virus estándar de confrontación; virus fijo de la rabia que se 
utiliza en las pruebas de desafío. 
3.11. Diagnóstico: Identificación de un caso de rabia mediante los datos 
clínicos y confirmado por las pruebas de laboratorio. 
3.12. Dosis: Cantidad de producto recomendada en la etiqueta para ser 
administrada en el animal. 
3.13. Esterilidad: Prueba de control de calidad, para asegurar que un 
producto está libre de microorganismos viables contaminantes. 
3.14. Etiqueta: Conjunto de dibujos, figuras, leyendas e indicaciones 
específicas, grabadas o impresas en envases y embalajes. 
3.15. Fecha de caducidad: Fecha asignada a un producto que designa el 
término del periodo en que debe aplicarse. 
3.16. Fluorocromo: Sustancia que brilla al paso de la luz excitadora, 
emitiendo una luz con una longitud de onda mayor que la de la luz excitadora; 
el color de emisión es verde, cuando se trata del isotiocianato de fluoresceína. 
3.17. Foco: Presencia de uno o más casos de rabia en un área geográfica 
determinada y en un tiempo determinado. 
3.18. Inmunofluorescencia: Reacción específica en que un conjugado 
reacciona con un antígeno específico, combinación que brilla con un color 
verde-manzana cuando se observa utilizando un microscopio de fluorescencia. 
3.19. Laboratorio aprobado: Laboratorio reconocido por la Secretaría de 
Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural para realizar servicios de diagnóstico 
y constatación de la rabia. 
3.20. Laboratorio de Control de Calidad: Laboratorio reconocido por la 
Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural, que se encarga de la 
verificación y aprobación del cumplimiento de los requisitos mínimos de los 
productos biológicos: vacunas, antígenos y reactivos, utilizados en el 
diagnóstico y control de la rabia. 
3.21. Laboratorio de Producción de Biológicos: Laboratorio reconocido por 
la Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural para la fabricación 
de las vacunas, antígenos y reactivos utilizados en el diagnóstico y control de la 
rabia. 
3.22. Lote: Es una cantidad específica de cualquier materia prima o 
producto que haya sido elaborado bajo condiciones equivalentes de operación y 
durante un periodo determinado. 
3.23. Médico Veterinario Aprobado: Profesional reconocido por la Secretaría 
de Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural. 
3.24. Murciélago hematófago o vampiro: Quiróptero que se alimenta 
exclusivamente de sangre de animales domésticos y silvestres, inclusive del 
hombre. 
3.25. Número de lote: Cualquier combinación de letras, números o 
símbolos, que sirven para la identificación de un lote y bajo el cual se amparan 
todos los documentos referentes a su manufactura y control. 
3.26. Potencia: Prueba de control de calidad para asegurar que un producto 
biológico es capaz de producir una respuesta inmune y proteger, lo cual se 
expresará en Unidades Internacionales o porcentaje de protección, de acuerdo 
a lo establecido en los requisitos mínimos de calidad del producto. 
3.27. Producto liberado: Es aquel que aprobó satisfactoriamente las 
pruebas de control de calidad y que está listo para su comercialización. 
3.28. Pruebas de Control de Calidad: Es el conjunto de actividades llevadas 
a cabo en el laboratorio para certificar que las características de un producto 
cumplen con las especificaciones vigentes. 
3.29. Pureza: Es la prueba mediante la cual se verifica que existe en el 
producto, únicamente el microorganismo indicado y que está libre de 
microorganismos extraños. 
3.30. Rabia: Enfermedad infecto-contagiosa, aguda y mortal que ataca el 
sistema nervioso central, provocada por un virus del género Lyssavirus y de la 
familia Rhabdoviridae. Transmitida al hombre o animales por la saliva de algún 
animal enfermo, infectante o por material contaminado. 
3.31. Secretaría: Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo Rural. 
3.32. Seguridad e inocuidad: Prueba de control de calidad para asegurar 
que un producto no cause reacciones desfavorables atribuibles al mismo. 
3.33. Semilla maestra: Microorganismo identificado, seleccionado y 
almacenado permanentemente, con un número de pases específicamente 
determinado a partir del cual se produce un biológico. 
3.34. Suero hiperinmune antinucleoproteína: Suero sanguíneo con niveles 
altos de anticuerpos específicos contra la nucleoproteína del virus de la rabia, 
obtenidos de dos maneras: 
Policlonal.- Preparado en animales vacunados repetidamente con vacuna 
antirrábica, conteniendo niveles altos de anticuerpos. 
Monoclonal.- Anticuerpos elaborados in vitro por linfocitos, procedentes de 
ratones (BALB/c) previamente vacunados con vacuna antirrábica, los cuales 
fueron fusionados con células del mieloma del ratón. 
3.35. Suspensión de absorción: Uno de dos tipos de suspensiones que 
sirven para absorber la fluorescencia típica y mostrar la especifidad de la 
prueba de inmunofluorescencia:  
a) suspensión infectada de cerebro de ratón infectado con virus rábico 
(usualmente CVS, virus estándar de confrontación) o nucleoproteína 
recombinante expresado por baculovirus en células de embrión de polilla; b) las 
suspensiones normales de tejido, sea suspensión normal de ratón (SCN) o 
baculovirus no infectado. 
3.36. Titulación: Prueba de control de calidad para asegurar que un 
producto contiene la cantidad de antígeno de virus rábico o anticuerpos 
establecidos en los requisitos mínimos. 
3.37. Técnica Directa de Anticuerpos Fluorescentes: Es la tinción de 
impresiones o tejidos con un conjugado, para determinar si presentan el 
antígeno específico. 
3.38. Vacunación: Administración de antígeno rábico a una persona o 
animal en la dosis adecuada, con el propósito de inducir la producción de 
anticuerpos neutralizantes contra la rabia. 
4. Requisitos mínimos para las vacunas contra la rabia, de virus activo 
modificado y de virus inactivado 
4.1. Características del producto.- Elaborado con una cepa aprobada de 
virus de rabia, activo modificado liofilizado o inactivado y presentado en forma 
líquida o liofilizado. 
4.2. Medios de producción.- Cultivos celulares primarios o a partir de líneas 
celulares o en cerebros de ratones lactantes. 
4.3. Requisitos de pruebas.- Por cada lote de producto terminado, antes de 
que salga al mercado, el elaborador y/o titular del registro debe realizar las 
siguientes pruebas: 
4.3.1. Prueba de pureza.- Esta prueba consiste en demostrar que el 
producto vacunal está libre de cualquier contaminante y que contiene 
únicamente el microorganismo que se indica. 
4.3.1.1. El análisis bacteriológico, usando medios para gérmenes aerobios y 
anaerobios, debe comprobar que el producto está exento de cualquier 
contaminación bacteriana. 
4.3.1.2. Se deben realizar las pruebas necesarias, a fin de demostrar que el 
producto está libre de hongos y levaduras. 
4.3.1.3. Se deben realizar las pruebas que se requieran para demostrar que 
el producto está libre de micoplasmas. 
4.3.1.4. Se deben realizar las pruebas necesarias, a fin de demostrar que el 
producto está libre de virus contaminantes. 
4.3.2. Prueba de inactivación viral para vacunas inactivadas.- La 
suspensión viral inactivada debe someterse a esta prueba, para la cual se debe 
utilizar: 
a)	10 ratones sanos y susceptibles a la rabia, de la misma cepa o estirpe, 
de 21 días de edad y de 12 a 16 g de peso. 
b)	Una camada de por lo menos 8 ratones lactantes sanos y susceptibles 
a la rabia, de 3 a 5 días de edad. 
c)	Por lo menos 2 conejos sanos y susceptibles a la rabia, de 1.5 a 2.5 
Kg de peso. 
Estos animales deben ser inoculados con la suspensión viral en estudio, por 
vía intracerebral: los ratones con 0.03 ml; los lactantes con 0.02 ml y los 
conejos con 0.25 ml. Todos los animales serán observados diariamente 
durante 21 días posinoculación. Se deben colectar los cerebros de los animales 
que mueran entre el 4o. y 21o. días posinoculación y se tratará de detectar el 
virus, inyectando 5 ratones por vía intracerebral con el material procedente de 
cada cerebro, debiéndose observar durante 30 días. Para confirmar la 
presencia o ausencia del virus de la rabia, se debe aplicar la prueba de 
anticuerpos fluorescentes. 
Si se confirma la presencia del virus, el lote será insatisfactorio. 
4.3.3. Prueba de seguridad o inocuidad para las vacunas inactivadas.- Esta 
prueba debe realizarse en ratones y en cobayos. 
En caso de que la vacuna deba reconstituirse, se hará utilizando el diluyente 
que la acompaña, de acuerdo a las indicaciones del laboratorio productor. 
4.3.3.1. Prueba en ratones adultos.- Se deben utilizar 10 ratones de 21 días 
de edad de 12 a 16 g de peso, sanos y susceptibles a la rabia, cada uno de los 
cuales se debe inocular con 0.5 ml de la vacuna en estudio por vía 
intraperitoneal y serán observados diariamente durante 21 días posinoculación. 
Para que la prueba se considere satisfactoria, todos los animales deben 
permanecer sanos, sin signos de enfermedad durante el periodo de prueba. 
4.3.3.2. Prueba en cobayos.- Se deben utilizar 2 cobayos de 250 a 300 g de 
peso, sanos y suceptibles a la rabia, los cuales deben ser inoculados por vía 
intraperitoneal con 2 ml del producto y deben ser observados diariamente 
durante 21 días posinoculación. 
La prueba se debe considerar satisfactoria cuando los cobayos 
permanezcan sanos, sin signos ni reacciones indeseables atribuibles al 
producto durante el periodo de observación. 
4.3.4. Prueba de seguridad o inocuidad para las vacunas de virus activo 
modificado.- Esta prueba debe realizarse en ratones y cobayos. 
La vacuna debe ser reconstituida con el diluyente que la acompaña, según 
indicaciones del laboratorio productor. 
4.3.4.1. Prueba en ratones adultos.- Se deben utilizar 10 ratones de 21 días 
de edad de 12 a 16 g de peso, sanos y susceptibles a la rabia, cada uno se 
inoculará con 0.5 ml de la vacuna, por vía intraperitoneal y deben ser 
observados diariamente durante 21 días posinoculación. 
La prueba se debe considerar satisfactoria, si en el periodo de observación 
sobrevive por lo menos el 80% de los ratones, sin presentar reacciones 
desfavorables atribuibles al producto, siempre y cuando se demuestre que los 
que murieron (<20%), fueron a causa de la cepa vacunal de rabia y no a causa 
de otros agentes infecciosos ajenos al producto. 
4.3.4.2. Prueba en cobayos.- Se deben utilizar 2 cobayos de 250 a 300 g de 
peso, sanos y susceptibles a la rabia, los cuales deben ser inoculados por vía 
intramuscular, en el músculo gastrocnemio, con 2 ml del producto y deben ser 
observados diariamente durante 21 días posinoculación. 
La prueba se debe considerar satisfactoria cuando los cobayos 
permanezcan sanos, sin signos ni reacciones indeseables atribuibles al 
producto durante el periodo de observación. 
4.3.5. Prueba de seguridad o inocuidad para el trámite de regulación de los 
productos nuevos y para la semilla de trabajo y/o cuando se requiera.- Esta 
debe realizarse en cada una de la(s) especie(s) animal(es) para la(s) que se 
recomiende el producto en la etiqueta. 
Se deben utilizar 10 animales sanos y susceptibles a la rabia, de cada 
especie a ser probada (negativos a anticuerpos antirrábicos a la dilución 1:2 
ante la prueba de seroneutralización). 
Cinco animales deben ser inoculados por vía intramuscular, cada uno con 
el equivalente a 10 dosis del producto; y cada uno de los otros cinco debe ser 
inoculado también por vía intramuscular, infiltrando el inóculo en un nervio 
mayor con el equivalente a 10 dosis del producto. 
Todos los animales deben ser observados diariamente durante 90 días, 
tiempo durante el cual deben permanecer sanos, sin signos de enfermedad. 
Si alguno de los animales presenta signos de enfermedad o se demuestra el 
virus de la rabia en su sistema nervioso central, el producto o la semilla se 
deben considerar insatisfactorios. 
4.4. Prueba de titulación para productos de virus activo modificado.- Para 
esta prueba se deben utilizar ratones blancos, todos de la misma cepa o 
estirpe, sanos y susceptibles a la rabia, de 21 días de edad y de 12 a 16 g de 
peso. 
Dos frascos de la vacuna de un mismo lote deben ser reconstituidos con el 
diluyente que los acompaña; media dosis será extraída de cada frasco para 
completar la dosis total, que será considerada como la dilución 100. 
Se realizarán diluciones decimales, desde 100 a 10-6 de la vacuna, con una 
solución tampón fosfatada (conteniendo 2% de suero de caballo, libre de 
anticuerpos contra la rabia, o albúmina de bovino al 0.4%), con un pH de 7.2 ± 
0.3, o con el diluyente recomendado por el productor. 
Con cada dilución se deben inocular 10 ratones de 21 días de edad de 12 a 
16 g de peso, por vía intracerebral, cada uno con 0.03 ml; empezando por la 
dilución más alta de 10-6, después con 10-5, 10-4 y así sucesivamente. 
Los ratones se deben observar diariamente durante 21 días posinoculación 
y se deben registrar las muertes y los signos de parálisis y espasmos que se 
observen en los ratones, esto a partir del quinto día posinoculación. Los ratones 
que mueran dentro de los primeros cuatro días posinoculación deben ser 
descartados. 
Para que la prueba sea válida, por lo menos el 80% de los ratones 
inoculados con cada dilución, deben sobrevivir, por lo menos hasta el cuarto 
día posinoculación. 
Con los ratones que mueran a partir de quinto día, se deben calcular los 
resultados por el método de Reed and Muench o de Spearmen-Karber, 
expresados como la dosis letal 50% para el ratón (DLR-50%). Los ratones que 
mueran o presenten signos atribuibles a rabia, se les debe hacer pruebas de 
inmunofluorescencia a partir del cerebro; por lo menos un animal por dilución. 
La vacuna probada debe tener un título mínimo de 103.3 DLR 50% por cada 
0.03 ml al inicio y durante el periodo de vigencia. 
4.5. Pruebas de potencia 
4.5.1. Prueba de potencia para vacunas de virus activo modificado.- Para 
esta prueba se deben utilizar 15 cobayos de la misma cepa o estirpe, sanos y 
susceptibles a la rabia, con un peso mínimo de 350 g, elegidos al azar, 10 
cobayos deben constituir el lote de prueba y los otros 5 el lote testigo. 
Dos frascos de la vacuna del mismo lote deben ser reconstituidos con el 
diluyente que los acompaña. 
La mitad de la dosis recomendada por el laboratorio productor será extraída 
de cada frasco, para completar una dosis total. Posteriormente se debe agregar 
el diluyente antes mencionado, hasta completar una dilución de 1:10. 
Cada uno de los cobayos del lote de prueba debe ser inoculado con 0.25 ml 
de la vacuna previamente diluida, en el músculo gastrocnemio, en la cara 
interna de la pierna, tan cerca del nervio como sea posible. 
Tres semanas después de la inoculación, los cobayos vacunados y los 
testigos deben ser desafiados con el virus CVS de rabia, con 0.5 ml de la 
dilución anterior a la que en una titulación previa haya matado al 100% de los 
cobayos, utilizando diluciones dobles, por vía intramuscular, en la extremidad 
opuesta a la empleada para la vacunación. 
Todos los cobayos deben ser observados diariamente durante 14 días 
posdesafío, las muertes que ocurran entre el primero o cuarto días posteriores 
al desafío serán descartadas. 
La prueba se debe considerar satisfactoria cuando por lo menos 8 de los 10 
cobayos vacunados sobrevivan sin manifestar signos de rabia y cuando por lo 
menos el 80% de los testigos mueran o presenten signos de rabia en el periodo 
de observación. 
4.5.2. Prueba de potencia para vacunas inactivadas.- Esta debe realizarse 
por la técnica del N I H (Técnica del Instituto Nacional de Salud de los 
E.E.U.U.). 
4.5.2.1. Prueba de potencia del N I H.- Los lotes comerciales deben 
probarse mediante la prueba del N I H. Para esta prueba se deben utilizar 
ratones blancos de la misma cepa o estirpe, sanos y susceptibles a la rabia, del 
mismo sexo, de 4 semanas de edad, de 15 a 20 g de peso y se requerirá del 
empleo de una vacuna de referencia aprobada por la Secretaría. 
Para la vacuna de prueba y la de referencia se debe seguir el mismo 
procedimiento. 
Con solución salina tamponada de fosfatos, pH 7.6, se deben realizar 
diluciones quíntuples seriadas de la vacuna (desde 1:10 hasta 1:1250). 
Con cada dilución se deben vacunar 16 ratones, cada uno con 0.5 ml por 
vía intraperitoneal; se comenzará por la dilución mayor y se terminará con la 
menor; se deben dejar 10 ratones sin vacunar, para titular el virus. 
La vacunación se debe repetir una semana después. Todos los ratones 
vacunados y los 10 testigos deben ser desafiados por vía intracerebral a los 7 
días después de la segunda vacunación; cada uno con 5 a 50 DLR 50% de 
CVS, contenidas en 0.03 ml y se deben observar diariamente durante 21 días 
posdesafío, registrando la morbilidad y mortalidad. 
Se deben registrar aquellos que mueran a partir del quinto día posdesafío, 
manifestando signos de rabia, tales como parálisis y espasmos; asimismo, se 
deben registrar aquellos que después de presentar signos de rabia sobrevivan 
al periodo de prueba. Los muertos antes del quinto día posdesafío serán 
descartados. 
La prueba se debe considerar válida cuando la titulación del virus de 
confrontación (CVS) tenga una concentración de 5 a 50 dosis letales para el 
ratón (DLR) 50%, en 0.03 ml. 
Se debe calcular el punto final de protección de las vacunas por el método 
de Reed and Muench o el de Spearman-Karber y se debe expresar como la DL 
50%, tanto de la vacuna de referencia como de la de prueba.  
La potencia de la vacuna de prueba debe ser expresada en Unidades 
Internacionales por mililitro (U.I. por ml) y calculada con la siguiente fórmula: 
POTENCIA DE		
	POTENCIA  
LA VACUNA = 	 DE 50% de la vacuna de prueba 	X	DE 
LA  
DE PRUEBA	DE 50% de la vacuna de referencia	
	VACUNA DE 
		
	REFERENCIA 
			EN 
UI/ml 
La prueba se debe considerar satisfactoria cuando la potencia relativa de la 
vacuna que está siendo probada tenga un valor mínimo de una U I por dosis. 
4.5.3. Prueba de potencia para el trámite de regulación de los productos 
nuevos, para la semilla de trabajo y/o cuando se requiera.- Debe realizarse en 
la(s) especie(s) animal(es) para la(s) que se recomienda el producto en la 
etiqueta; el protocolo de prueba que se debe seguir debe estar previamente 
autorizado por la autoridad competente. En él se debe establecer que se usará 
como "Cepa" de exposición un virus de rabia de origen murciélago hematófago 
para las vacunas contra la rabia paralítica bovina o derriengue y de origen 
canino para las vacunas utilizadas en perros y gatos. 
Para que los resultados sean satisfactorios, el producto debe proteger por lo 
menos al 80% de los vacunados con una sola dosis, al ser desafiados al 
término del periodo de protección indicado por el laboratorio productor y deben 
morir por lo menos el 80% de los testigos, después de ser observados durante 
90 días. 
Para efectos de comprobación, el elaborador y/o titular del registro debe 
asegurar todos los requisitos señalados durante el periodo de vigencia que 
ofrezca, por cada lote del producto, a partir de la fecha de elaboración. 
Para muestra de retención, en vacunas de virus activo modificado el título 
mínimo aceptable debe ser de 103 DLR 50% en 0.03 ml, durante 3 meses más 
a la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. 
Para vacunas inactivadas el valor mínimo será de una U.I. por dosis, 
durante tres meses más a la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. 
4.6. Prueba de vacío para vacunas liofilizadas.- Esta prueba se debe 
realizar en un cuarto oscuro, empleando el aparato de Tessler (generador de 
alta frecuencia), el cual debe aplicarse a cada frasco de vacuna liofilizada a una 
distancia de no más de 5 mm de la retapa de aluminio. Existirá vacío si la 
descarga eléctrica ilumina el interior del frasco de la vacuna. 
Al término del proceso de liofilización se puede sellar también con gas 
inerte, para lo cual, en este caso, no se realizará la prueba de vacío. 
4.7. Prueba de humedad para vacunas liofilizadas.- Esta prueba consiste en 
determinar el porcentaje de humedad que tiene la vacuna liofilizada, que debe 
ser igual o menor del 4%, se podrá determinar por los métodos de 
Abderhalden, Karl Fischer o Termogravimétrico. 
4.8. Prueba de pH. 
4.8.1. Para vacunas de virus activo modificado.- La vacuna reconstituida 
debe mostrar un pH entre 6.9 y 7.4, el cual debe ser comprobado con un 
potenciómetro previamente calibrado. 
4.8.2. Para vacunas de virus inactivado.- Deben mostrar un pH entre 7.2 y 
8.2. 
5. Especificaciones para el conjugado antirrábico preparado con 
anticuerpos policlonales  
5.1. Características del producto: Anticuerpos policlonales específicos 
contra el virus rábico, marcados con un fluorocromo. 
5.2. Medios de producción: Suero hiperinmune producido en cualquier 
especie animal adecuada, siempre y cuando tenga un título elevado de 
anticuerpos, el cual será marcado con un fluorocromo. 
5.3. Requisitos de prueba: Con cada lote de producto terminado, antes de 
que salga al mercado, el elaborador del producto debe realizar las siguientes 
pruebas: 
5.3.1. Titulación: El conjugado debe ser reconstituido con el volumen de 
diluyente recomendado por el productor. Para la titulación del conjugado 
antirrábico se debe aplicar la técnica directa de anticuerpos fluorescentes (AF). 
5.3.2. Evaluación: Se debe usar un microscopio de fluorescencia equipado 
con la óptica adecuada e iluminación de luz ultravioleta. La fuente luminosa 
debe contar con filtros excitadores que dejen pasar solamente la luz ultravioleta 
y se deben utilizar filtros barrera que impidan que la luz ultravioleta llegue al ojo 
del observador. 
Se deben utilizar 3 criterios para la evaluación del conjugado antirrábico: 
1.- Intensidad de la tinción específica. 
2.- Cantidad de inclusiones y polvo antigénico fluorescente. 
3.- Tinción inespecífica de fondo. 
El conjugado policlonal debe tener las características mínimas expresadas 
en el Cuadro 1. 
CUADRO 1 
CRITERIOS * DE 
FLUORESCENCIA
DILUCIONES DEL CONJUGADO


1:2 
SCN CVS 
1:4 
SCN CVS 
1:8 
SCN CVS 
1:16 
SCN CVS

Intensidad tintorial 
específica
++++ +
++++ - 
++++ - 
 ++ - 

Inclusiones y polvo 
fluorescente 
++++ + 
++++ - 
++++ - 
++++ -

Tinción inespecífica de 
fondo
+++ +++
 + + 
 - - 
 - - 

* Usando un microscopio de fluorescencia con lámpara de vapor de 
mercurio o de halógeno. 
(El grado de intensidad tintorial específica y de tinción inespecífica son 
términos característicos, reconocidos por la O.M.S.) 
6. Especificaciones para el conjugado antirrábico preparado con 
anticuerpos monoclonales 
6.1. Características del producto: Anticuerpos monoclonales específicos 
contra la nucleoproteína del virus rábico, marcados con un fluorocromo. 
6.2. Medios de producción: Línea de ratones (BALB/c) inmunizados con 
vacuna antirrábica, de los cuales se cosechan los linfocitos y éstos se fusionan 
con células del mieloma del ratón. 
6.3. Requisitos de prueba: Con cada lote de producto terminado, antes de 
que salga al mercado, el elaborador debe realizar las siguientes pruebas: 
6.3.1. Titulación: El conjugado debe ser reconstituido con el volumen de 
diluyente recomendado por el productor. Para la titulación del conjugado se 
debe aplicar la técnica directa de anticuerpos fluorescentes. 
Para ello, con el conjugado se debe hacer una serie de diluciones dobles 
base 10. 
Con cada una de las diluciones se deben teñir improntas positivas y 
negativas conocidas. Anotar los resultados obtenidos, según los criterios que 
se mencionan en el punto 6.3.2. de evaluación, para obtener el título 
correspondiente. El título mínimo del conjugado debe ser 1:10. 
6.3.2. Evaluación: Se debe usar un microscopio de fluorescencia equipado 
con óptica adecuada e iluminación de luz ultravioleta. La fuente luminosa debe 
contar con filtros excitadores que dejen pasar solamente la luz ultravioleta y se 
deben utilizar filtros barrera que impidan que la luz ultravioleta llegue al ojo del 
observador. 
Se deben usar 3 criterios para la evaluación del conjugado antirrábico 
monoclonal: 
1.- Intensidad de la tinción específica. 
2.- Cantidad de inclusiones y polvo. 
3.- Tinción inespecífica de fondo. 
El conjugado monoclonal debe tener las características mínimas 
expresadas en el Cuadro 2. 
CUADRO 2 
CRITERIOS * DE 
FLUORESCENCIA
DILUCION DEL CONJUGADO


1:10
1:20
1:40
1:80

Intensidad tintorial específica
++++
++++
+++
++

Inclusiones y polvo fluorescente
++++
++++
+++
++

Tinción inespecífica de fondo
- 
- 
- 
-

* El grado de intensidad tintorial específica y de tinción inespecífica son 
términos característicos, reconocidos por la Organización Mundial de la Salud.  
6.3.3. La caducidad del conjugado debe estar especificada en la etiqueta del 
mismo. 
6.3.4. Para efectos de comprobación, el elaborador debe asegurar que los 
productos conserven su potencia después del periodo de vigencia que ofrezca 
para cada uno de los lotes, y que será de seis meses para el CVS y SCN, 
almacenados de -40 a -70ºC. 
Para los conjugados en forma líquida o liofilizados, el periodo será de seis 
meses, almacenados entre -20 y -70ºC. 
7. Especificaciones para la suspensión de cerebro de ratón infectado 
con virus estándar de confrontación (CVS) 
7.1. Características del producto.- Suspensión de cerebros de ratones 
infectados con CVS, utilizada para evaluar la fluorescencia específica del 
conjugado para el diagnóstico de la rabia. 
7.2. Medios de producción.- Ratones de 3 a 4 semanas, sanos y 
susceptibles a la rabia, inoculados por vía intracerebral con una dilución de 
entre 10-2 y 10-4 de la semilla del virus CVS. Los cerebros de los ratones se 
cosechan cuando éstos presenten signos de rabia como incoordinación y 
parálisis, entre otros. 
La suspensión final debe diluirse 1:5 (20%) con el diluyente apropiado y 
homogeneizarse. 
La suspensión de CVS puede elaborarse también a partir de cultivos de 
tejidos celulares infectados, cosechados al 7o. u 8o. día posinoculación. Las 
suspensiones de CVS se deben mantener congeladas entre -40 a -70ºC, o en 
nitrógeno líquido. 
7.3. Requisitos de prueba.- Con cada lote de producto terminado el 
elaborador debe realizar las siguientes pruebas: 
7.3.1. Titulación: La suspensión debe tener un título mínimo de 105 DL 50% 
/ 0.03 ml en ratones de tres semanas de edad, sanos y susceptibles a la rabia. 
7.3.2. Absorción: Al mezclar un volumen de conjugado con 4 volúmenes de 
la suspensión de cerebros infectados (CVS), se debe absorber la fluorescencia 
específica, según se ilustra en el Cuadro 1. 
8. Especificaciones para la suspensión de cerebro de ratón normal 
(SCN) 
8.1. Características del producto: Suspensión de cerebros de ratones no 
infectados, utilizados para absorber la fluorescencia inespecífica del conjugado 
para el diagnóstico de la rabia. 
8.2. Medios de producción: Cerebros de ratones sanos y susceptibles a la 
rabia, de 3 a 4 semanas de edad. La cosecha de los cerebros debe diluirse a 
una dilución 1:5 (20%), con solución salina buferada y homogeneizarse. 
La suspensión de SCN se debe mantener congelada entre -40 a -70ºC, o en 
nitrógeno líquido. 
8.3. Requisitos de prueba: Con cada lote de producto terminado el 
elaborador debe realizar las siguientes pruebas: 
8.3.1. Absorción: Al mezclar un volumen de conjugado con 4 volúmenes de 
suspensión de cerebro normal (SCN) no se debe absorber la fluorescencia 
específica, ver Cuadro 1. 
9. Del personal técnico responsable 
9.1. Los establecimientos dedicados a la elaboración de productos 
biológicos deben contar con un Médico Veterinario Aprobado, así como con un 
profesionista calificado en el área de producción y otro en el área de control de 
calidad. 
10. Productos importados 
Los productos importados deben cumplir con todos los requisitos 
establecidos en esta Norma y con las disposiciones correspondientes. 
Los productos biológicos importados deben provenir de una empresa 
elaboradora con registro federal o nacional, de su país de origen. 
Sólo pueden importarse productos que se estén comercializando libremente 
en el país de origen, lo cual debe ser avalado con el certificado de libre venta o 
su equivalente. 
11. Sanciones 
El incumplimiento a las disposiciones contenidas en esta Norma, se 
sancionará conforme a lo establecido por la Ley Federal de Sanidad Animal y la 
Ley Federal de Metrología y Normalización. 
12. Concordancia con normas internacionales 
Esta Norma Oficial Mexicana no es equivalente con ninguna norma 
internacional. 
13. Bibliografía 
Baer, G M. ed. The Natural History of Rabies. 2nd edition Boca Raton 
Florida. CRC Press Inc. 
Farmacopea Europea II 1986 V.2.1.5. 
Instructivo para el rotulado de productos de uso veterinario sujetos a control 
de acuerdo a la Ley Federal de Sanidad Fitopecuaria de los Estados Unidos 
Mexicanos.- Dirección General de Sanidad Animal.- Departamento de Control 
de Productos para uso Animal. Agosto de 1990. 
Kaplan, M M y Koprowski H. ed. La Rabia: Técnicas de Laboratorio. Tercera 
ed. Ginebra, Organización Mundial de la Salud. 1976 (Serie de Monografías No. 
23). 
Manual de requisitos mínimos para productos biológicos. Dirección General 
de Sanidad Animal, Dirección de Registros y Servicios Zoosanitarios, 
Subsecretaría de Ganadería, Secretaría de Agricultura, Ganadería y Desarrollo 
Rural. 
Norma Oficial Mexicana NOM-011-SSA2-1993, Para la prevención y control 
de la rabia. Publicada en el Diario Oficial de la Federación, tomo CDXCVI, 
No. 18 pp. 29-45; 25 de enero de 1995, México. 
Organización Mundial de la Salud: 8o. Informe del Comité de Expertos de la 
OMS sobre Rabia. Serie de Informes Técnicos No. 824, Ginebra, 1992. 
Precausata P; Soulebot J.P. Bugand M; Bruna. et Chappuis G.: Modalites 
de Production et Inmunite Conferre par un Vaccin antirabique Inactive 
Provenant de Culture Cellulaire. Comp. Inmun. Microbiol. Infect. Dis. vol 5. Nos. 
1-3, pp. 217-226-1982. Pergamon Press Ltd. Great Britain. 
Proposed Requirements for Rabies Vaccine for Veterinary Use. 
Requirements for Biological Substances No. 29. World Health Organization, 
WHO/BS/79, 1237. 
SARH-CANIFARMA-OIRSA. Requisitos Mínimos de Productos Biológicos 
Veterinarios. 108 p. 1992. 
14. Disposiciones transitorias 
La presente Norma Oficial Mexicana entrará en vigor al día siguiente de su 
publicación en el Diario Oficial de la Federación. 
Sufragio Efectivo. No Reelección. 
México, D.F., a 24 de mayo de 1996.- El Director General Jurídico, Roberto 
Zavala Echavarría.- Rúbrica.